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CellGS TRIFic detection assay 說明書

 更新時(shí)間:2017-11-20 點(diǎn)擊量:1518

世界*實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商  Cell Guidance Systems 正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國代理,  Cell Guidance Systems 在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國科研客戶帶來的產(chǎn)品,的服務(wù),簽約  Cell Guidance Systems 就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們zui大的收獲

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Cell Guidance Systems位于英國劍橋。我們成立于2010年,于2011年開設(shè)了美國辦事處。多年來,我們一直悄然建立起質(zhì)量,服務(wù)和創(chuàng)新的聲譽(yù)。我們是世界上zui激動(dòng)人心的生物技術(shù)區(qū)域之一。我們致力于為世界各地的研究團(tuán)體(包括日本,美國,荷蘭,意大利,新加坡和英國)帶來創(chuàng)新,開發(fā)擴(kuò)大生命科學(xué)研究可能性的產(chǎn)品。我們的許多產(chǎn)品都是真正具有開創(chuàng)性的:例如,ETS-胚胎培養(yǎng)基(在劍橋大學(xué)的Magdalena Zernicka-Goetz教授實(shí)驗(yàn)室開發(fā))能夠從干細(xì)胞中生產(chǎn)人造胚胎。PODS™(在京都理工學(xué)院森山教授實(shí)驗(yàn)室開發(fā))克服了蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性限制,為新療法提供了希望。

除了提供試劑和研究服務(wù),我們還參與了基于PODS™技術(shù)的幾個(gè)治療研究領(lǐng)域。我們正在與英國,意大利和日本的研究人員和公司進(jìn)行合作,為各種疾病開發(fā)疫苗和治療藥物。

 

TRIFic™ detection assay

CodeDescription
EX101TRIFic™ CD9 Exosome Assay, 96 wells
EX102TRIFic™ CD63 Exosome Assay, 96 wells
EX103TRIFic™ CD81 Exosome Assay, 96 wells

 

概觀

TRIFic™外泌體測(cè)定與ELISA測(cè)定類似,但有一些顯著差異。與ELISA測(cè)定不同,沒有酶促反應(yīng)。而是直接用Europium標(biāo)簽檢測(cè)目標(biāo)。TRIFic™外泌體分析快速提供純化或未純化樣品的定量數(shù)據(jù),包括以方便的96孔格式直接測(cè)量血漿中的外泌體。TRIFic™外泌體分析可用于廣泛使用的外來體標(biāo)志物; 四跨膜蛋白CD9,CD63和CD81。TRIFic™exosome分析提供清晰,一致的數(shù)據(jù)。

屬性

在TRIFic TM外泌體測(cè)定中,使用相同的抗體來將靶與測(cè)定板結(jié)合并用于檢測(cè)。該測(cè)定法由與鏈霉抗生物素包被的平板結(jié)合的單克隆抗體(用生物素標(biāo)記)組成,其捕獲存在于外泌體表面上的蛋白質(zhì)(圖1)。隨后,使用相同的單克隆抗體(用銪標(biāo)記)進(jìn)行檢測(cè)。由于捕獲和檢測(cè)抗體是相同的,它們需要兩個(gè)相同表位的連接拷貝才能檢測(cè)到信號(hào)。外來體提供了一個(gè)理想的結(jié)構(gòu)來連接CD9分子,并允許在該測(cè)定中檢測(cè)CD9。外來體通常具有朝向附著表面的多個(gè)CD9拷貝和可用于檢測(cè)的另外的CD9分子。捕獲和檢測(cè)抗體的任何非特異性結(jié)合都不可能產(chǎn)生信號(hào)。

 


TRIFic™外泌體分析示意圖。

  1. 生物素化的抗體與鏈霉抗生物素包被的測(cè)定板結(jié)合。  
  2. 生物樣本被添加。外來體和任何游離抗原被抗體捕獲。 
  3. 銪標(biāo)記的抗體被加入并與外來體抗原特異性結(jié)合。結(jié)合的單體的表位已經(jīng)被占用并且未被檢測(cè)到。樣品在時(shí)間分辨熒光板閱讀器上讀取。

優(yōu)點(diǎn)

  • 測(cè)定的簡(jiǎn)單性導(dǎo)致高度的重現(xiàn)性。
  • 銪被用于檢測(cè),提供高度的靈敏度。  
  • 只有抗原顯示在樣品內(nèi)的支持物上的多個(gè)拷貝(如在外泌體上的四跨膜蛋白)可用該測(cè)定法檢測(cè),導(dǎo)致特異性增加。

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

使用TRIFic TM外來體測(cè)定法對(duì)純化的外泌體進(jìn)行滴定顯示在寬范圍內(nèi)外泌體和TRF單位的量之間的線性關(guān)系。該測(cè)定能夠檢測(cè)亞微克級(jí)別的外泌體。 

 

用純化的外來體摻入的生物樣品(用PBS稀釋1:1或1:5)顯示了即使在復(fù)雜的生物流體如血漿和腦脊液中的測(cè)定的靈敏度。

 

對(duì)各種細(xì)胞系進(jìn)行CD9 TRIFic TM外泌體測(cè)定。超過80個(gè)樣品加上標(biāo)準(zhǔn)可以用一個(gè)試劑盒進(jìn)行測(cè)試。  

 

在20個(gè)癌癥患者尿液樣品中的CD9的TRIFic TM外泌體測(cè)定分析顯示了廣泛的外泌體含量。

參考

Agnieszka Kaminska,Mark Platt,Joanna Kasprzyk,Beata KuVnierz-Cabala,Agnieszka Gala-Budzinska,Olga Wofnicka,Benedykt R.Jany,F(xiàn)ranciszek Krok,Wojciech Piekoszewski,Marek Kufniewski等人。(2016)。尿胞外囊泡:糖尿病患者腎功能的潛在生物標(biāo)志物。 糖尿病研究雜志 2016年,文章ID 5741518。

 

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