ComplementTech C1s Enzyme說明書

ComplementTech成立于 2005 年，前身是Advanced Research 技術(shù)公司，ART公司成立于1993年，是一家有著20多年補(bǔ)體研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗的生物制品公司，為用戶提供zui高質(zhì)量的補(bǔ)體類產(chǎn)品及其它生物試劑產(chǎn)品。ComplementTech公司領(lǐng)導(dǎo)均是有數(shù)十年在科研機(jī)構(gòu)從事補(bǔ)體領(lǐng)域研究的科學(xué)家，確保了公司產(chǎn)品的地位和*品質(zhì)。ComplementTech 致力于通過就補(bǔ)體試劑在補(bǔ)體領(lǐng)域以及其他相關(guān)科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用中的使用提供技術(shù)建議和專業(yè)知識來推進(jìn)醫(yī)學(xué)研究。

名稱： C1s酵素     C1s Enzyme                       

目錄號：     A104

提供的大小：         250微克/瓶

濃度：          1.0 mg / mL   （見實際濃度分析證書）

形式：                         冷凍液體

活性：                     > 90％C1s將與過量的C1-INH結(jié)合

純度：                        通過SDS PAGE> 90％（注意：C1s酶未減少86,000，但在SDS PAGE上減少為58,000和28,000鏈）

緩沖液：                       10 毫摩爾磷酸鈉，145 毫 的NaCl，pH 7.2的

滅絕科夫。       阿_280 納米=  1.0毫克0.96 / mL的純的C1s

分子量：   86,000Da（2鏈）

防腐劑：             無，0.22μm過濾。

存儲：                     -70 ^ò C或以下。  避免凍結(jié)/解凍。

資源：                       正常 人血清（通過認(rèn)證測試顯示為陰性

對于 HBsAg，HTLV-I / II，STS以及針對HCV，HIV-1和HIV-II的抗體）。

預(yù)防措施：              使用正常的預(yù)防措施處理人體血液制品。

產(chǎn)地：                       制造在美國。

一般描述

            C1s酶是C1s酶的活化形式。  C1s是C1復(fù)合體的亞基，其是補(bǔ)體經(jīng)典途徑中的補(bǔ)體成分。  C1s酶是一種非活性酶原，直到C1被激活。  當(dāng)C1結(jié)合并結(jié)合抗原（免疫復(fù)合物）的抗體激活時，C1s酶被激活，產(chǎn)生C1r酶，種蛋白酶啟動級聯(lián)反應(yīng)。  C1復(fù)合體中的C1r酶激活產(chǎn)生C1s酶的C1s酶。  C1復(fù)合物是一個C1q，兩個C1r和兩個C1s分子的非共價鈣依賴性復(fù)合物。 C1q通過其六個臂中的兩個或更多個與IgG或IgM的Fc結(jié)構(gòu)域結(jié)合。  多臂與免疫復(fù)合物的結(jié)合導(dǎo)致復(fù)合物中的兩種C1r蛋白（蛋白酶酶原）激活產(chǎn)生兩種蛋白酶，其裂解并激活復(fù)合物中的兩種C1s原酶。 C1s酶原的這種活化導(dǎo)致其裂解成具有58,000和28,000 道爾頓片段的兩條鏈C1s酶。 

            活化的C1s酶切割補(bǔ)體組分C4釋放C4a并引發(fā)C4b與活化表面的共價連接。  活化的C1s也裂解C2，并且C2的較大片段與表面連接的C4b結(jié)合，形成經(jīng)典途徑的C4b ，C2a，C3 / C5轉(zhuǎn)化酶。

物理特性和結(jié)構(gòu)

            C1s酶是一種高分子量的雙鏈胰蛋白酶樣蛋白酶，由58,000和28,000道爾頓的二硫鍵連接的鏈組成。  C1s以31μg/ mL存在于血漿中。  C1s酶是高分子量單鏈胰蛋白酶樣酶原（86,000道爾頓）。  的C1s 酶原通過C1R酶（活化的多茲 ; Morikis，D。和，AW和Sim，RB（1997）Lambris，JD（2005））。  兩個C1r在存在鈣的情況下形成C1r-C1r復(fù)合物，其在鈣存在下又與兩個C1s分子形成穩(wěn)定的復(fù)合物。  該四聚體可以存在于溶液中，但在C1q的存在下其與C1q結(jié)合形成在鈣存在下穩(wěn)定的C1復(fù)合物。  C1r自激活和隨后的C1s激活，當(dāng)其處于C1復(fù)合物中時與C1r與C1酯酶抑制劑（C1-INH）的弱關(guān)聯(lián)控制，并且與純化的C1r發(fā)生類似的穩(wěn)定化。 然而，C1s和C1r酶通過與C1-INH結(jié)合而不可逆地失活。

功能       

            單獨(dú)的C1s酶可以用來激活C4和C2，但normallt 它會做到這一點(diǎn)，而在復(fù)雜的C1q的。 在Mg ++存在下，活化的C4b和C2a可形成流體相C4b ，C2a為經(jīng)典途徑的C3 / C5轉(zhuǎn)化酶。  在存在鈣的情況下，C1s仍然能夠與C1r結(jié)合并且該復(fù)合物能夠與C1q結(jié)合。  得到的C1q-C1r-C1s復(fù)合物是*活性的C1分子，其將在流體相中或帶有抗體如EA的細(xì)胞上激活C4和C2（Dodds，AW和Sim，RB（1997）; Morgan，BP（2000） ））。  EA是綿羊紅細(xì)胞，其表面結(jié)合有兔IgM抗綿羊紅細(xì)胞抗體（CompTech＃B200）（Morgan，BP（2000））。

測定

            通過測量其結(jié)合蛋白酶抑制劑C1抑制劑（C1-INH，CompTech＃A140）的能力來檢查C1s的活性。  它也可以通過測量其裂解C4或C2的能力來測定。  它能夠形成由一個C1q，兩個C1r和兩個C1s分子組成的激活的C1復(fù)合物，并且可以測定該產(chǎn)物C1復(fù)合物。  后，的C1s是胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶，因此它切割許多用于其它蛋白酶測定相同的合成底物（例如，Pefachrome 從Centerchem，Inc.）中。

規(guī)    

            激活的C1由C1-INH控制。  C1s酶和C1-INH形成抗SDS凝膠分離的共價復(fù)合物。在補(bǔ)體激活過程中，C1復(fù)合物通過與免疫復(fù)合物結(jié)合而快速激活   通過與C1-INH相互作用（Ziccardi，RJ（1982）。  與免疫復(fù)合物的結(jié)合很快（10-20秒）并且結(jié)合的C1復(fù)合物的激活需要幾分鐘，但是C1-INH也已證明是快速和無活性C1R或的C1s保持4分鐘，然后加入免疫復(fù)合物到等離子體中后（羅斯， GD（1986）; 齊卡爾迪，RJ（1981））。  純化的C1s酶和C1-INH的相互作用是比較慢。 

遺傳學(xué)

            C1s 的EMBL / Genbank cDNA登錄號為J04080。  C1r和C1s的基因緊密連鎖，位于染色體12p13上。

不足之處

            已經(jīng)發(fā)現(xiàn)C1的三個組分中的每一個的缺陷（Ross，GD（1986））。  C1r和C1s缺陷患者傾向于系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）和復(fù)發(fā)性化膿性感染（Rother，K。等（1998））。  它們?nèi)狈?jīng)典途徑功能，可能會或可能不會在血液中顯示抗原。 

疾病

            請參閱上面的標(biāo)題為“缺陷"部分。

注意事項/毒性/危險

            這種蛋白質(zhì)是從人血清中純化出來的，因此必須使用適合于處理任何血液衍生產(chǎn)品的預(yù)防措施，即使來源通過認(rèn)證測試顯示HBsAg，HTLV-I / II，STS陰性和抗HCV抗體， HIV-1和HIV-II。

參考

Dodds，AW和Sim，RB編輯（1997年）補(bǔ)充。實用方法（ISBN 019963539）牛津 大學(xué) 按， 牛津。

摩根，BP編輯。（2000）補(bǔ)充方法和協(xié)議。  （ISBN 0-89603-654-5）Humana Press，Inc.，托托瓦， 新澤西州。

Morikis，D.和Lambris，JD編輯。（2005）補(bǔ)體系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)生物學(xué)。（ISBN 0-8247-2540-9）Taylor＆Francis Group，F(xiàn)lorida。

羅斯，GD（1986）補(bǔ)體系統(tǒng)的免疫生物學(xué)。（ISBN 0-12-5976402）學(xué)術(shù)出版社，奧蘭多。

羅瑟，K.，直到，GO，和H?nsch，GM（1998）的 補(bǔ)體系統(tǒng)。（ISBN 3-540-61894-5）Springer -Verlag， 海德堡。

Ziccardi，RJ（1981）在生理條件下激活經(jīng)典補(bǔ)體途徑的早期成分。J. Immunol。126：1769年至1773年。

Ziccardi，RJ（1982）通過分子內(nèi)自動催化機(jī)制自發(fā)活化人補(bǔ)體（C1）的個組分。J. Immunol。128：2500至2504年。

Ziccardi，RJ。（1982）阿用于穩(wěn)態(tài)C-1抑制劑的新角色：人補(bǔ)體的成分的激活的控制。J. Immunol。128：2505-2508。